公共场所茶具微生物检验方法

细菌总数测定

指公用茶具经过采样处理，在一定条件下培养后（培养基成分、培养温度、培养时间、pH值、需氧性质等），1cm2表面上所含菌落的总数。本方法规定的培养条件下所得结果，只包括一群在营养琼脂上生长发育的嗜中温性需氧菌落总数。

操作步骤

采样方法

1 随即抽取清洗消毒后准备使用的茶具。

2 用灭菌生理盐水湿润棉拭子，在茶具内、外缘涂抹50cm2，即以1~1.5cm高处一圈（口唇接触处）用灭菌剪刀剪去手接触部分，将棉拭子放入10mL生理盐水内，4h内送检。

检验方法

1 将放有棉拭子的试管充分振摇。此液为1：10稀释液。

2 以无菌操作，吸取2mL检样，分别注入到两块灭菌平皿内，每皿1mL。如污染严重，可十倍递增稀释，即吸取1mL加到9mL灭菌生理盐水中，混匀，此液为1：100稀释液。每个稀释度做两块平皿。

3 将已融化冷至45℃左右的营养琼脂培养基倾入平皿，每皿约15mL，并立即旋摇平皿。冷凝后放36℃±1℃培养箱培养48h。

大肠菌群

指一群在37℃、24h培养能发酵乳糖、产酸、产气、需氧和兼性厌氧的革兰阴性无芽孢杆菌。

该菌主要来源于人畜粪便，故以此作为粪便污染指标来评价被检物的卫生质量。

采样方法

纸片法：用灭菌生理盐水湿润5cm×5cm大肠菌群快速测定纸片两张，分别粘贴在茶具内、外缘口唇接触处，约30s后取下，置于无菌塑料袋内。