大肠菌群显色培养基

大肠菌群显色培养基(Chromogenic Coliform Agar)

用　　途：

用于大肠菌群的快速检测和计数。

原    理：

蛋白胨和酵母膏粉提供碳氮源和微量元素；氯化钠可维持均衡的渗透压；琼脂是培养基的凝固剂；十二烷基硫酸钠抑制革兰氏阳性菌；显色底物与大肠菌群β-半乳萄糖苷酶发生特异性反应，水解底物，释放出显色基团，在淡黄色平板上产生绿色的菌落。

配方（每升）：

蛋白胨 10g

酵母膏粉 3g

氯化钠 5g

十二烷基硫酸钠 0.1g

琼脂 12g

显色底物 2.7g

最终pH 7.0±0.2

使用方法：

1、称取本品32.8g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，无需高压灭菌。

2、以无菌手续取样品25g或25mL，加入含225mL无菌磷酸盐缓冲液(或生理盐水)的三角瓶内，充分振摇或用均质器均质1min成1：10稀释液，然后以1：10继续稀释，选择三个适宜的连续稀释度，每个稀释度接种两个平皿。

3、采用倾注法：将培养基水浴冷却至约50℃，准备直径90mm已灭菌平皿，每个培养皿接种1ml样品，然后倾注约15ml上述溶解的培养基，混匀使其凝固，倒置，37℃培养24小时。

4、 采用表面接种法：冷却至约50℃，摇匀将培养基倾注于已灭菌平皿中。在室温可保存一天或在冰箱里贮存数天(避光，4℃)。样品用划线接种法或滤膜法，37℃培养24小时。

5、观察结果。

质量控制：        

本品倾注平皿后呈淡黄色，下列菌株接种后于36±1℃培养18～24h生长情况如下表。

菌    名 菌    号 生长状况 培养特征

大肠埃希氏菌 ATCC25922   良好   菌落绿色

柠檬酸杆菌 ATCC8090　 良好 菌落绿色

鼠伤寒沙门氏菌 CMCC50115 良好 菌落无色

粪肠球菌 ATCC29212 受抑制 -----

贮    存：贮存于10-30℃，避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖。贮存期二年。

规    格：可配置1L的培养基干粉。