Bolton 肉汤

Bolton 肉汤         Bolton broth

用    途：

用于空肠弯曲菌选择性增菌培养。（GB4789.9-2008）

原    理：

乳白蛋白水解物、动物组织酶解物提供碳、氮源；酵母浸膏提供各种维生素；氯化钠维持均衡的渗透压；丙酮酸钠和偏亚硫酸氢钠能中和培养基的有毒物质，也能增强培养基的空气耐受力；a-酮戊二酸提供生长因子，促进空肠弯曲菌的生长；碳酸钠提供空肠弯曲菌最有利的酸碱环境；头孢派酮和多粘菌素B抑制革兰氏阴性菌；万古霉素和三甲氧苄胺嘧啶抑制革兰氏阳性菌；两性霉素B抑制酵母和真菌的生长。

配方（每升）：

1基础配方

动物组织酶解物 10g

乳白蛋白水解物 5g

酵母浸膏 5g

氯化钠 5g

丙酮酸钠 0.5g

偏亚硫酸氢钠 0.5g

碳酸钠 0.6g

a-酮戊二酸 1g

最终pH 7.2±0.2

2抗生素冻干配套试剂

头孢派酮 0.02g

万古霉素 0.02g

三甲氧苄胺嘧啶乳酸盐   0.02g

两性霉素B   0.01g

多粘菌素B 0.01g

3 完全培养基

基础培养基 100ml

无菌裂解脱纤维绵羊或马血 5ml

抗生素冻干配套试剂 1支

使用方法：

1. 称取本品27.6g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121℃高压灭菌15min。

2. 在冷却至45℃左右的bolton肉汤，在无菌条件下，每100ml培养基加入经反复冻融的无菌脱纤维羊或马血5ml和1支配套试剂SR0340。

3. 样品处理参考标准。

4. 预增菌与增菌：

在微需氧条件下，以100r/min的振荡速度，36±1℃培养4h。42℃±1℃继续培养48±2h。

质量控制：

下列质控菌株接种后于42℃±1℃微需氧培养48±2h结果如下：

菌    名     菌    号   菌落特征

空肠弯曲菌 ATCC33291 肉汤混浊  

小肠结肠弯曲菌 ATCC43478   肉汤混浊

酵母菌   ATCC9763   肉汤澄清或微弱生长

金黄色葡萄球菌 ATCC6538   肉汤澄清或微弱生长

大肠埃希氏菌 ATCC25922 肉汤澄清或微弱生长

贮    存：贮存于避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。

规    格：250g

参考文献：

1． GB/T  4789.9-2008 中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物学检验 空肠弯曲杆菌检验

2． 美国FDA  Bacteriological Analytical Manual   Chapter 7   Campylobacter