MC培养基

MC培养基        (Chalmers Agar)

用    途：

用于乳酸菌饮料中乳酸菌的菌落计数(GB/T 4789.35-2010)。

原    理：

大豆蛋白胨、牛肉膏粉和酵母膏粉提供氮源、维生素和生长因子；葡萄糖和乳糖为可发酵糖类提供碳源；乳酸菌发酵糖产酸使菌落周围碳酸钙溶解，以辨别乳酸菌；琼脂是培养基的凝固剂；中性红为pH指示剂。

配方（每升）：

大豆蛋白胨 5g

牛肉膏粉 3g

酵母膏粉 3g

葡萄糖 20g

乳糖 20g

碳酸钙 10g

琼脂 15g

中性红 0.05g

最终pH6.0±0.2

使用方法：

1、 称取本品76g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121℃高压灭菌15-20min。

2、 无菌操作将经过充分摇匀的检样25g（或25mL），放入含有225mL灭菌生理盐水的灭菌广口瓶内，振摇均匀，即为1：10稀释液，依次做1：100、1：1000……稀释。

3、 将培养基凉至50℃左右，注入平皿中约15mL（本品含有碳酸钙，摇匀后方可倾注平板），待琼脂凝固。

4、 选择2-3个合适的稀释度，分别在做10倍递增稀释的同时，吸取0.1mL稀释液于平皿上，用L型棒涂布，每个稀释度做2个平皿。翻转平板置于36±1℃兼性厌氧培养48h。

5、　选择菌落数在30-300个之间的平皿进行计数，并乘以相应的稀释倍数，以10的指数表示进行报告。

质量控制：

下列菌株接种后于36±1℃培养72h结果如下：

菌    名 菌    号 生长率 生长特征

保加利亚乳杆菌 As1.1482 － 平皿底为粉红色，菌落较小，圆形，红色，

边缘似星状，直径2±1mm，可有淡淡的晕

嗜热链球菌 IFFI6038 ≥80% 平皿底为粉红色，菌落较小，圆形，红色，边缘整齐，可有淡淡的晕

贮    存：贮存于避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。

规    格：250g

参考文献：

1．GB/T4789.35-2008 中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物学检验标准 乳酸菌检验

2．GB 4789.35-2010 中华人民共和国国家标准 食品安全国家标准 食品卫生微生物学检验标准 乳酸菌检验