牛津琼脂基础

牛津琼脂基础        （Oxford Agar Base）

用    途：

用于单核增生李斯特氏菌的选择性分离(SN0184-2005)。

原    理：

多价胨和可溶性淀粉提供碳氮源、维生素和生长因子；氯化钠维持均衡的渗透压；李斯特氏菌水解七叶苷与铁离子反应形成黑色的6,7-二羟基香豆素；氯化锂和其它的抗生素能抑制革兰氏阴性菌和大多数革兰氏阳性菌；琼脂是培养基的凝固剂。

配方（每升）：

多价胨 19g

可溶性淀粉   1g

氯化钠   5g

琼脂   15g

七叶苷     1g

柠檬酸铁铵     0.5g

氯化锂 15g

最终pH7.0±0.2

使用方法：

1、称取本品56.5g，加入1000 mL蒸馏水或去离子水，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121℃灭菌15分钟。

2、临用时加热溶化琼脂，冷至50℃,将放线菌酮0.4 g、多粘菌素E 0.02g、盐酸吖啶黄0.005g、头孢双硫唑甲氧0.002g、磷霉素0.01g溶于5mL乙醇和5mL水中制成混合溶液并过滤除菌, 每100 mL培养基中加入1mL混合溶液，摇匀后倾注灭菌培养皿。

3、取待检菌划线接种于牛津琼脂平板上。于35℃培养24—48h。

4、观察结果。李斯特氏菌在牛津琼脂平板上生长24h后菌落呈黑色，直径为1 mm，在其周围形成一个黑色环。培养48h，直径3—4 mm，除在菌落周围在一环外，在菌落中心部位的深层也形成黑点。挑取5个可疑菌落，接种于TSA-YE平板上，纯培养后进行鉴定。              

质量控制：

质控菌株接种后于35℃培养24-48h，结果如下：

菌    名 菌    号   生长状况 培养特征

单核细胞增生李斯特氏菌 CMCC(B)54002   良好   灰绿色菌落，中心凹陷黑色，周围有黑色，φ3-4mm

大肠埃希氏菌   ATCC25922 受抑制   ——

粪链球菌       CMCC(B)32223 受抑制 ——

贮    存：贮存于避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。

规    格：100g

参考文献：

1.SN/T 0184-93  中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 进出口食品中单核细胞增生李斯特氏菌检验

2.SN/T 0184.1-2005  中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 进出口食品中单核细胞增生李斯特氏菌检验

3.SN/T 0184.2-2005  中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 进出口食品中单核细胞增生李斯特氏菌检验 第2部分 多重PCR方法