06年年初，国家知识产权局公开一项黑龙江省烟草科学研究所发明的专利——一种转基因烟草检测方法及试剂盒，专利公开号CN1718743。该检测方法包括巢式PCR定性检测、荧光实时PCR定量检测和目的基因PCR检测。1、巢式PCR定性检测：获得可用于PCR反应的样本DNA，同时检测样本的花椰菜花叶病毒启动子调控序列CaMV35s、根癌农杆菌终止子调控序列nos和抗卡那霉素选择标记基因序列NPTII，引物的核苷酸序列见序列表SEQIDNo.1至SEQIDNo.12；2、对检出为转基因阳性的样本，进一步采用荧光实时PCR定量检测：采用花椰菜花叶病毒启动子调控序列CaMV35s通用引物和荧光标记探针，测定样本的荧光强度，矫正Ct值；并代入用梯度稀释的阳性对照得到的标准曲线方程，计算得出样本中转基因的量；CaMV35s定量检测的引物和探针的核苷酸序列见序列表SEQIDNo.13至SEQIDNo.15；3、目的基因PCR检测：采用烟草马铃薯Y病毒复制酶基因、烟草马铃薯Y病毒外壳蛋白基因、烟草普通花叶病外壳蛋白基因、烟草黄瓜花叶病毒外壳蛋白基因、烟草普通花叶病复制酶基因、苏云金杆菌杀虫蛋白BT-cryIA（c）基因的PCR扩增引物，对定性检测为阳性的样本进行目的基因扩增，测定样本所转入基因的种类，引物的核苷酸序列见序列表SEQ IDNo.16至SEQIDNo.27。据称，该检测方法重复性好，可靠性高，检测费用低，省时省力；试剂盒灵敏度高、特异性强、操作简便，便于实现转基因烟草检测的规范化。
