MH琼脂

MH琼脂         (Mueller Hinton Agar)

用    途：

适用于扩散法进行药敏试验。

原    理：

牛肉浸出粉和酸水解酪蛋白提供氮源、维生素和氨基酸；可溶性淀粉吸收有毒的代谢产物；琼脂是培养基的凝固剂。

配方（每升）：

琼脂 17g

牛肉     300g(从中提取浸出粉)

可溶性淀粉 1.5g

酸水解酪蛋白 17.5g

最终pH7.3±0.2

使用方法：

1、 称取本品38g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121℃高压灭菌15min，备用。

2、 试验菌液的制备：从TSA平皿上挑取3—5个形态相似的菌落顶端部分接种MHB或TSB培养基。经36±1℃培养4—6小时后，比浊至0.5麦氏单位。

3、 接种：用无菌棉拭浸取比浊好的菌液，在管壁内轻轻转压除去过多菌液，然后再轻轻涂抹培养基，每一平皿涂抹三次。每次涂抹后均需将平皿转动60度，再行下一次涂抹。每一质控菌株涂抹三个平皿。

4、 贴片：接种后的平皿置室温片刻，待稍干后，用无菌镊子将抗生素纸片均匀贴布于平皿琼脂表面。各纸片间中心间距不得小于24mm，纸片距平皿边不得小于15mm。一旦纸片接触琼脂表面，即不可再移动，因此时药物已开始扩散。

5、 培养：纸片贴妥后，在15—30分钟内，将平皿翻过来置于36±1℃培养16—24h后，观察结果。平皿培养时不宜堆放，以二个相叠为宜。

质量控制：

质控菌株添加下列抗菌素后，于36±1℃培养16—24h后结果如下：

抗生素名称     纸片抗生素含量(μg)   大肠埃希菌ATCC25922  (mm) 铜绿假单胞菌ATCC27853(mm) 金黄色葡萄球菌ATCC25923(mm)   粪肠球菌ATCC29212  (mm)  

庆大霉素   10   19—26   16—21     19—27

羧苄青霉素 100   23—29   18—24 ——

四环素 30   18—25   ——   19—28

多粘菌素B 300IU     12—16     11—16   ——

氯霉素 30   21—27   ——   19—26

SMZCO 1.25/23.75     24—32     ——     23—32       ≥20

头胞哌酮 75   28—34   23—29   24—33

贮    存：贮存于避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。

规    格：250g