中华人民共和国专业标准
ZBX 66022-87
Technological regulations of soy sauce with process of high-Salt-diluted state fermentation
本规程适用于以大豆、面粉为主要原料，采用高盐稀态发酵法酿造酱油的工艺。
1 原料要求
1.1 大豆 应符合 GB 1352-86《大豆》 及GB 2715-81《粮食卫生标准》规定。
1.2 面粉、麸皮 应符合 GB 2715-81 规定。
1.3 食盐 应符合GB 2721-81《食盐卫生标准》及GB 5461-85《食用盐》规定。
1.4 水 应符合GB 5749-85《生活饮用水卫生标准》规定。
1.5 添加剂 应符合GB 2760-86《食品添加剂使用卫生标准》规定。
2 工艺流程
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┃ 大豆 ┃
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┃ ┏━━━┓
┃ ┃ 菌种 ┃
浸渍除杂 ┗━┳━┛
┃ ┃
┃ ┃
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┃ 面粉 ┃ ┃ ┃ 种曲 ┃
┗━┳━┛ 蒸煮 ┗━┳━┛
┃ ┃ ┃
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制曲
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┃食盐溶液┣━━━━┫
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发酵
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抽油
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配兑
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加热澄清━━━━灭菌━━━┫成品┃
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3 制作方法
3.1 种曲制造
3.1.1 菌种 可采用米曲霉、酱油曲霉或适用于酱油生产的其他霉菌。
3.1.2 米曲霉试管种的培养
3.1.2.1 凡用于菌种培养的皿具要经彻底清洗和灭菌。试管灭菌前尚需配上棉塞，并用防潮纸包扎管口。
3.1.2.2 试管菌种用豆汁培养基〔配制方法见附录 A（参考件）〕。
3.1.2.3 新配制并经灭菌的斜面培养基，应置25～30℃条件下培养 3～4天，检查确无污染方可使用。
3.1.2.4 在无菌条件下移接的米曲霉斜面菌种，于28～30℃条件下培养 72h，待菌株发育成熟才可采用。
3.1.2.5 为使菌种保持良好特性，应定期做好分纯工作，宜半年进行一次，留选生产性能好的菌株。
3.1.3 锥形瓶种培养
3.1.3.1 原料配比及培养管理：锥形瓶种培养基采用麸皮80%，豆饼粉10%和面粉10%。经混合后,拌入1.0～1.1倍清水,充分拌匀,装入预先洗涤、干燥、配好棉塞及经1kg/cm**2蒸汽压灭菌 60min的250mL锥形瓶中。装瓶量以料厚1cm为度。培养基要经1kg/cm**2蒸汽压灭菌60min。灭菌后随即将曲料摇松。待凉后在无菌条件下接种。培养温度为28～30℃。培养过程摇瓶两次，首次在曲料开始发白结块时进行；相隔 4～6h当曲料再行结块，则进行第二次摇瓶。瓶种培养72h，米曲霉发育成熟即可使用，或存冰箱待用。
3.1.3.2 瓶种的质量要求：培养成熟的瓶种，菌丝发育粗壮，整齐、稠密，顶囊肥大, 孢子呈黄绿色，发芽率不低于90%，孢子数达90亿个／克曲（干基）以上。
3.1.4 种曲的培养及质量要求
3.1.4.1 种曲的培养管理 ：
3.1.4.1.1 用具要求清洁，竹匾及曲室应以硫磺或甲醛熏蒸24h左右。硫磺用量25g/m**3，若用甲醛，则10mL/m**3。
3.1.4.1.2 培养基采用麸皮80%、豆饼粉15%，面粉5%。拌水量为原料的100%～110%。 3.1.4.1.3 常压蒸煮60min。
3.1.4.1.4 熟料经摊凉、搓散，降温至30℃即可接入锥形瓶纯种，接种量为原料量的0.1%～0.2% 。曲料用竹匾培养，料厚为 1～1.2cm。曲室温度前期 28～30℃，中、后期25～28℃。曲室干湿球温差,前期为1℃,中期 1～0℃,后期 2℃,培养过程翻曲两次，当曲料品温达35℃左右，稍呈白色并开始结块时,进行首次翻曲,翻曲要将曲料搓散,当菌丝大量生长,品温再次回升时,要进行第二翻曲。每次翻曲后要把曲料摊平,并将竹匾位置上下调换，以调节品温。当生长嫩黄色的孢子时，要求品温维持在34～36℃，当品温降到与室温相同时才开天窗排除室内湿气。种曲培养72h。成熟的种曲应置清洁、通风的环境 中存放。
3.1.4.2 种曲的质量要求：种曲的孢子数要求50亿个／克曲（干基）以上，孢子发芽率应不低于90%。
3.2 原料处理
3.2.1 食盐溶液的配制 原盐用水溶解后，要经过滤沉淀，待澄清后方能使用。本工艺所用食盐溶液浓度为18°Be’/20℃。
3.2.2 大豆的浸渍及除杂 浸豆前浸豆罐先注入2/3容量的清水，投豆后将浮于水面的杂物清除。投豆完毕，仍需从罐的底部注水，务使污物由上端开口随水溢出，直至流出的水清澈为止。浸豆过程应换水1～2次，免使豆变质。浸豆务求充分吸水，浸至豆粒膨胀无皱纹，带弹性，以两指挤捏时易使皮肉分开，将豆粒切开不发现干心时可视为适度。出罐的大豆，晾至无水滴出为止 才投进蒸料罐蒸煮
3.2.3 大豆的蒸煮 用常压或加压蒸煮均可。若用加压蒸煮工艺，进蒸汽前应将管道的冷凝水排清。进汽时尽量开大汽阀，使罐内迅速升压。蒸煮时要注意排清罐内的冷空气。蒸煮所用蒸汽压力 为1.8kg/cm**2,经保压8～10min后立即排汽脱压,并要求在20min内使熟料品温降至40℃左右。
3.2.4 熟料质量要求 经蒸煮的大豆，组织变柔软，色呈淡褐，有熟豆香气，手感绵软。
3.3 制曲
3.3.1 酱油曲的管理
3.3.1.1 曲室、曲池及用具必须经清洁，并经灭菌（可用5%漂白粉溶液喷洒）。
3.3.1.2 种曲用量为原料的0.1%～0.3%。种曲应先与 5倍量左右的面粉混合搓碎，以利接种均匀。
3.3.1.3 熟豆应与种曲及面粉充分混合，使种曲的孢子和面粉粘附豆粒表面。
3.3.1.4 曲料进池要求速度快，厚度均匀、疏松程度一致。料层厚度控制在30cm以内，初进池的曲料含水量控制在45%左右。
3.3.1.5 曲料进池后品温调整为30～32℃,当品温上升,应启动风机,风温控制30～31℃，相对湿度要求90%以上。当曲料出现发白结块，品温达35℃时进行首次翻曲，使曲料松散, 翻曲后要将曲料拨平，并使品温降至30～32℃，待品温回升，曲料再次结块则进行第二次翻曲。第二次翻曲后,注意做好压缝工作,以防进风短路。制曲后期,菌丝已着生孢子,此时要求室温保持30～32℃,干温球温差2℃左右,以利孢子发育。整个培养过程共40～44h。
3.3.2 酱油曲的质量要求 酱油曲水分28%～32%，旦白酶话力（福林法）1000单位／克曲（干基）以上。
3.4 发酵
3.4.1 发酵管理
3.4.1.1 发酵容器的型式不限，但应设假底及出料品。所用的材质应能防止腐蚀。
3.4.1.2 酱油曲用18°Be`/20℃食盐溶液拌湿后才进发酵罐（或池）内。制醪时食盐溶液用量为原料量的 2～2.5倍。
3.4.1.3 制醪后的第三天起进行抽油淋浇，淋油量约为原料量的10%其后每隔一周淋油一次，淋油时注意控制流速，并在酱醅表面均匀淋浇，避免破坏酱醅的多孔性状。
3.4.1.4 发酵期3～6个月。此时豆粒已溃烂，酱醅色泽已变暗褐，醅液氨基酸态氮含量约为 1g/100mL，前后一周无大变动时，意味醅已成熟，可以放出酱油。抽油后，头滤渣用18°Be’/20℃食盐溶液浸泡，10天后抽二滤油，二滤渣用加盐后的四滤油及18°Be’/20℃食盐溶液浸泡，时间也为10天，放出三滤油后，三滤酱渣改用80℃热水浸泡一夜，即行放油，抽出的四滤油应即加盐，使浓度达18°Be’/20℃，供下批浸泡二滤酱渣使用。四滤渣含食盐量应在2g/100g以下，氨基酸含量不应高于0.05g/100g。
3.4.1.5 淋油前及结束后，所用工具（水泵及胶管），应注意清洁。每批发酵完毕，要及时清渣，发酵容器要彻底清洗，并用5%漂白粉液涂擦灭菌。场地必须保持清洁。
4 配兑 各滤生酱油的质量应按SB 74-78《酱油、食醋、酱类的检验方法》进行检测，然后按产 品等级标准进行配兑。
5 加热沉淀 经配兑的酱油，加热至90℃，送进沉淀罐静置沉淀 7天。
6 灭菌 已澄清的酱油，必须经60℃加热灭菌 30min后，才装瓶出售。
7 质量要求 执行 ZB X 66012-87《高盐稀态发酵酱油》质量标准的规定。
附 录 A 豆汁琼脂培养基的配制 （参考件）
A.1 配方 MgSO4·7H2o:0.05% (NH4)2SO4: 0.05% KH2PO4:0.1% 可溶性淀粉:2.0% 琼脂:2.0% 5°Be’豆汁定容至 100mL pH5.5～6.5
A.2 豆汁的制备 选新鲜大豆，用水浸泡务使吸胀，捞出并用水清洗，然后加入5～6倍大豆量的清水 煮沸2～5h煮豆时注意补水，最后用药棉过滤，即得豆汁。每100g大豆可制得5°Be’豆汁 100mL。
附加说明：
本标准由商业部副食品局提出。
本标准由中国酿造学会酱油酱学组负责起草。
本标准主要起草人袁振远、冯禧瑞、曾左辛。
中华人民共和国商业部 1987- 11-20 发布 1988-07-01 实施
