MH肉汤

MH肉汤           (Mueller Hinton Broth)

用    途：  

适用于稀释法进行药敏试验。

原    理：

牛肉浸出粉和酪蛋白水解物提供氮源、维生素和氨基酸；可溶性淀粉吸收有毒的代谢产物。对氨基苯甲酸及其类似物证明对磺胺起拮抗作用；胸腺嘧啶脱氧核苷降低甲氧苄氨嘧啶的活性，使其抑菌圈缩小。因此对氨基苯甲酸和胸腺嘧啶或胸腺嘧啶脱氧核苷尽量减少至最低限度。

配方（每升）：

牛肉 300g(从中提取浸出粉)

可溶性淀粉     1.5g

酪蛋白水解物 17.5g

最终pH7.3±0.2  

使用方法：（两倍稀释法）

1、 称取本品21g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121℃高压灭菌15min，定量（等体积）分装于一系列灭菌试管中。

2、 药液稀释：于第一管中加入同体积的药液，以对倍稀释法逐管稀释药液，于倒数第二管中取出一半体积的溶液作为空白对照，不加试验菌，以便观察供试液是否被污染，最后一支管作为阳性生长对照管。

3、 取适宜的稀释级菌液加入到各抑菌管中，（一般接种量为每mL药液含10—105个细菌）摇匀，使试验菌与药液能充分接触。

4、 将各试验管置于36±1℃培养16—24h，特殊试验菌可适当延长一定时间。

5、 最低抑菌浓度（MIC）的确定：

经培养后的试验管呈现澄明，摇匀后仍澄清者，认为该管无菌生长，若培养管呈现混浊状态，表明有菌生长。从无菌生长的各管中找出最低浓度的试验管，该管的药物浓度即为最低抑菌浓度。

6、 最低杀菌浓度（MBC）的确定：

当药物浓度在稍高于MIC值浓度下的抑菌作用是不可逆的，称为杀菌作用。最低杀菌浓度的确定即依次将未见细菌生长和各管各吸取适量涂布于合适的琼脂培养基平板上，在规定的温度下培养18—24h，平板上的菌落数小于5个的最小稀释度的药物浓度即为最低杀菌浓度。

质量控制：

质控菌株添加下列抗菌素后，于36±1℃培养16—24h后抑菌浓度如下：

抗生素名称 抗生素含量(μg /mL) 质控菌株及编号

大肠埃希菌ATCC25922 (μg /mL) 铜绿假单胞菌ATCC27853

(μg /mL) 金黄色葡萄球菌ATCC25923 (μg /mL) 粪肠球菌ATCC29212 (μg /mL)

庆大霉素 4、2、1、0.5、0.25、0.125、0.0625 0.25—1   0.5—2   0.12—1 ——

氯霉素 32、16、8、4、2、1、0.5   2—8   ——      2—8   4—16

贮    存：贮存于避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。

规    格：100g