亚硫酸盐-多粘菌素-磺胺嘧啶琼脂基础（SPS）

亚硫酸盐-多粘菌素-磺胺嘧啶琼脂基础(SPS)       (Sulfite Polymixin Sulphadiazine Agar Base)

用    途：

用于食品和矿泉水中产气荚膜梭菌的分离培养和计数(GB/T 8538-2008，GB/T4789.28-2003中4.69，GB/T4789.13-2003)。    

原    理：

胰酪 胨和酵母膏粉提供碳氮源、维生素和生长因子；亚硫酸钠和柠檬酸铁铵用于检测硫化氢的产生，使菌落中心呈黑色；琼脂是培养基的凝固剂；多粘菌素B和磺胺嘧啶钠抑制非梭菌的细菌生长。

配方（每升）：

胰酪 胨     15g

酵母膏粉 10g

柠檬酸铁铵 1g

琼脂   15g

最终pH 7.0±0.2

使用方法：

1、 称取本品41.0g，加入蒸馏水或去离子水1000 mL ，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，每 瓶250 mL ，121℃高压灭菌15 mL。

2、 待SPS培养基冷至50℃左右，每100 mL培养基基础加入配套试剂2支（SR0150）（试剂a：，亚硫酸钠50mg和试剂b：磺胺嘧啶钠1.2mg和多粘菌素B1.2mg），摇匀。

3、 无菌操作取食品样品35g(mL)放入均质器中，加0.1%蛋白胨水225mL，均质1—2min，然后吸取1：10稀释液按1mL加0.1%蛋白胨水9mL做成10-2—10-6系列稀释液，吸取各稀释液1 mL分别加到两个灭菌平皿，再向平皿中倾注培养基15 mL，缓慢地旋转平皿，使其与接种物混合均匀。

4、 琼脂凝固后，将平板正置于厌氧罐内，于36±1℃培养24h。

5、 取出平板用肉眼观察生长情况和观察有无黑色菌落。挑选生长有30—300个黑色菌落的平板计数。

质量控制：

下列菌株接种于SPS琼脂平板于36±1℃培养24 h结果如下：

菌    名   菌    号   生长状况 培养特征

产气荚膜梭菌   HK9051   良好 黑色菌落

金黄色葡萄球菌 ATCC6538 较好   白色菌落

大肠埃希氏菌 ATCC25922   抑制 ----

贮    存：贮存于避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。

规    格：250g

参考文献：

1． GB/T  4789.13-2003 中华人民共和国国家标准食品卫生微生物学检验 产气荚膜梭菌检验

2． GB/T  4789.28-2003中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物学检验 染色法, 培养基和试剂

3． GB/T  8538-2008 中华人民共和国国家标准 饮用天然矿泉水检验标准