Skirrow琼脂

Skirrow琼脂        Skirrow agar

用    途：

用于空肠弯曲菌的选择性分离。（GB4789.9-2008，ISO标准）

原    理：

蛋白胨、胰蛋白胨、酵母浸膏提供碳、氮源、维生素、生长因子；氯化钠维持均衡的渗透压；丙酮酸钠、焦亚硫酸钠、硫酸亚铁有利于弯曲菌的生长。头孢呱酮可抑制革兰氏阴性细菌和部分革兰氏阳性菌、两性霉素B 抑制真菌生长、利福平可抑制非弯曲菌其他厌氧菌；琼脂是培养基的凝固剂。

配    方：

1 基础培养基：（每升）

蛋白胨 15g

胰蛋白胨 2.5g

酵母浸膏 5g

氯化钠 5g

琼脂 15g

水 1000mL

最终pH 7.2±0.2

2 配套试剂：(每100ml)

丙酮酸钠 0.025g

焦亚硫酸钠 0.025g

硫酸亚铁 0.025g

头孢哌酮 0.0032g

两性霉素B 0.001g

利福平 0.001g

3完全培养基：

基础培养基 100mL

配套试剂　　　　　　　　　 1支

无菌脱纤维羊血 5mL

使用方法:

1. 称取本品42.5g，加入蒸馏水或去离子水1000mL搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121℃高压灭菌15min，备用。

2. 每支冻干配套试剂在无菌操作条件下加入1mL无菌水，45℃水浴加热完全溶解。将灭菌培养基融化并冷却至45℃左右，每100mL基础培养基加入1支配套试剂（SR0330）和5mL冻融的无菌脱纤维羊血，混合后倾注平板。

3. 用接种环挑取24h增菌液、48h增菌液及相应的1：50稀释液，划线平板，在微需氧条件，42℃±1℃培养48±2h。

4. 观察结果。

质量控制：

下列质控菌株接种后于42℃±1℃微需氧培养48±2h结果如下：

菌    名   菌    号   生长率　 菌落特征  

空肠弯曲菌 ATCC33291 >70% 扁平，灰色，湿润，有光泽，呈沿线扩散生长，不溶血，不规则边缘

大肠埃希氏菌 ATCC25922 全部抑制(0)   无特征性菌落或微弱生长(1)

金黄色葡萄球菌 ATCC6538 全部抑制(0)　 无特征性菌落  

贮    存：贮存于避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。

规    格：250g

参考文献：

1． GB/T  4789.9-2008 中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物学检验 空肠弯曲杆菌检验

2． SN 0175-1992 中华人民共和国进出口商品检验行业标准 出口食品中弯曲杆菌检验方法

3． GB/T  4789.9-2003中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物学检验 空肠弯曲杆菌检验

4． GB/T  4789.28-2003中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物学检验 染色法, 培养基和试剂

5． ISO10272-1995 Microbiology of food and animal feeding stuffs-----Horizontal method for detection of thermotolerant Campylobacter