改良CCD琼脂

改良CCD琼脂

Modified charcoal cefoperazone deoxycholate agar,mCCDA

用    途：

用于空肠弯曲菌的选择性分离培养。（GB4789.9-2008，ISO标准）

原    理：

肉浸液、动物组织酶解物、酪蛋白酶解物提供碳、氮源、维生素、生长因子；氯化钠维持均衡的渗透压；木炭具有解毒、收集二氧化碳和改变表面张力的作用；去氧胆酸钠为选择性抑菌剂；头孢哌酮可抑制普通肠道菌生长、两性霉素B 抑制酵母和真菌生长、利福平可抑制非弯曲菌其他厌氧菌。硫酸亚铁和丙酮酸钠有利于空肠弯曲菌的生长；琼脂是培养基的凝固剂。

基础配方（每升）：

肉浸液 10g

动物组织酶解物 10g

氯化钠 5g

木炭 4g

酪蛋白酶解物 3g

去氧胆酸钠 1g

硫酸亚铁 0.25g

丙酮酸钠 0.25g

琼脂 12g

最终pH 7.2±0.2

配套试剂配方：（每100mL）

头孢哌酮 0.0032g

两性霉素B 0.001g

利福平 0.001g

使用方法:

1. 称取本品45.5g，加入蒸馏水或去离子水1000mL搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121℃高压灭菌15min，备用。

2. 每支冻干配套试剂在无菌操作条件下加入1mL无菌水，45℃水浴加热完全溶解。将灭菌培养基融化并冷却至45℃左右，每100mL基础培养基加入1瓶配套试剂SR0320混合后倾注平板。

3. 用接种环挑取24h增菌液、48h增菌液及相应的1：50稀释液，划线平板，在微需氧条件，42℃±1℃培养48±2h。

4. 观察结果。

质量控制：

下列质控菌株接种后于42℃±1℃微需氧培养48±2h结果如下：

菌    名 菌    号 生长率　 菌落特征

空肠弯曲菌 ATCC33291 >70% 扁平，灰色，湿润，有光泽，呈沿线扩散生长，不溶血，不规则边缘

大肠埃希氏菌 ATCC25922 全部抑制(0) 无特征性菌落或微弱生长(1)

金黄色葡萄球菌 ATCC6538   全部抑制(0)　 无特征性菌落  

白色念珠菌 ATCC10231 微弱生长(1) 无特征性菌落

贮    存：贮存于避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。

规    格：250g

参考文献：

1． GB/T  4789.9-2008 中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物学检验 空肠弯曲杆菌检验

2． 美国FDA  Bacteriological Analytical Manual   Chapter 7   Campylobacter

3． ISO10272-1995 Microbiology of food and animal feeding stuffs-----Horizontal method for detection of thermotolerant Campylobacter