尿素琼脂培养基基础

尿素琼脂培养基基础         (Urea Agar Base)

用    途：

用于鉴别肠道菌尿素酶试验 (GB4789.4－2010，《中华人民共和国药典》2010年版，SN0170-92和GB13091-91，ISO标准)。

原    理：

蛋白胨提供碳源和氮源；氯化钠维持均衡的渗透压；磷酸二氢钾是缓冲剂；具有尿素酶的细菌分解培养基中的尿素，产生大量的氨，使培养呈碱性，酚红指示剂在pH6.8时呈黄色，pH8.1呈粉红色；琼脂是培养基的凝固剂。

配方（每升）：

蛋白胨 1g

氯化钠 5g

葡萄糖 1g

磷酸二氢钾 2g

酚红 0.012g

琼脂 12g

最终pH7.2±0.2

使用方法：

1、 称取本品21g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121℃高压灭菌15min，待冷却至50—55℃，每200mL培养基加入经过滤除菌的20%的尿素溶液20mL或5支(029100)40%的尿素溶液共10mL，尿素的最终浓度为2%。分装无菌试管，制成斜面。

2、 挑取待检菌的新鲜纯培养物，浓密地涂布在尿素琼脂斜面上，置36±1℃培养24h。

3、 于2—4h及24h各观察一次结果。培养基呈现红色时为阳性反应，颜色不变者为阴性反应。如为阴性可继续培养观察至4d。

质量控制：

质控菌株接种后于36±1℃培养24h结果如下 ：

菌    名          菌    号      生长状况         培养特征

普通变形杆菌        HK7131         良好         培养基变红色

大肠埃希氏菌       ATCC25922       良好         培养基不变色

贮    存：贮存于避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。

规    格：250g

参考文献：

1.GB/T4789.4－2003 中华人民共和国国家标准食品卫生微生物检验 沙门氏菌检验

2.GB/T4789.28－2003中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物检验 染色法，培养基和试剂

3.SN0170－92 中华人民共和国进出口商品检验行业标准 出口食品中沙门氏菌属（包括亚利桑那菌）检验方法

4.GB/T4789.4－2008 中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物检验 沙门氏菌检验

5.GB 4789.4－2010 中华人民共和国国家标准 食品安全国家标准 食品卫生微生物检验 沙门氏菌检验

6.GB 13091－91 中华人民共和国国家标准 饲料中沙门氏菌的检验方法

7. 《中华人民共和国药典》2010年版，附录XI J 微生物限度检查。

8．ISO 6579：2002 Microbiology of food and animal feeding stuffs-----Horizontal method for the detection of Salmonella spp.