MRS培养基（莫匹罗星锂盐改良MRS培养基基础）

MRS培养基（莫匹罗星锂盐改良MRS培养基基础）

(Man Rogosa Sharpe Medium)（Li-Mupirocin Modified MRS Medium Base）

用    途：

用于乳酸菌的分离、计数和培养。（GB/T 4789.35-2010，SN/T1941.1-2007和ISO标准）

原    理：

蛋白胨、牛肉膏粉、酵母膏粉提供氮源、维生素、生长因子；葡萄糖为可发酵糖类；磷酸氢二钾为酸碱缓冲剂；柠檬酸三铵、硫酸镁、硫酸锰、吐温-80和乙酸钠为培养各种乳酸菌提供生长因子，其成分还能抑制某些杂菌；琼脂是培养基的凝固剂。

配方（每升）：

蛋白胨 10g

牛肉膏粉 5g

酵母膏粉 4g

葡萄糖 20g

吐温-80 1ml

磷酸氢二钾 2g

乙酸钠 5g

柠檬酸三铵 2g

硫酸镁（MgSO4.7H2O） 0.2g

硫酸锰（MnSO4.4H2O） 0.05g

琼脂 15g

最终pH  6.2±0.2

使用方法

1、 称取本品64.3g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121℃高压灭菌15min，备用。

2、 无菌操作将经过充分摇匀的检样25g（或25mL），放入含有225mL灭菌生理盐水的灭菌广口瓶内，振摇均匀，即为1：10稀释液，依次做1：100、1：1000……稀释。

3、 将培养基凉至50℃左右，注入平皿中约15mL，待琼脂凝固。

4、 选择2-3个合适的稀释度，分别在做10倍递增稀释的同时，吸取0.1mL稀释液于平皿上，用L型棒涂布，每个稀释度做2个平皿。翻转平板，乳杆菌在兼性厌氧条件，双歧杆菌在厌氧条件下，混合菌应分别兼性厌氧和厌氧条件下，36±1℃培养48h。

5、 选择菌落数在30-300个之间的平皿进行计数，并乘以相应的稀释倍数，以10的指数表示进行报告。

质量控制：

下列质控菌株接种后于36℃±1℃兼性厌氧培养48h结果如下：

菌    名 菌    号 生长率 培养特征

保加利亚乳杆菌 AS1.1482 ≥90% 圆形凸起,边缘整齐,无色不透明

干酪乳杆菌 HK10031 ≥90% 圆形凸起,边缘整齐,无色不透明

嗜热链球菌 IFFI6038 ≥90% 圆形凸起,边缘整齐,无色不透明

婴儿双歧杆菌 CICC6069 ≥90% 圆形，中等大小，边缘整齐，瓷白色

贮    存：贮存于避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。

规    格：250g

参考文献：

1．GB/T4789.35-2008 中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物学检验标准 乳酸菌检验

2．GB 4789.35-2010 中华人民共和国国家标准 食品安全国家标准 食品卫生微生物学检验标准 乳酸菌检验

3．SN/T1941.1-2007 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准 进出口食品中乳酸菌检验方法 第1部分 分离与计数方法。

4．ISO 15214-1998 Microbiology of food and animal feeding stuffs-----Horizontal method for the emumeration of mesophilic lactic acid bacteria-----Colony-count technique at 30℃.