卵黄琼脂培养基基础

卵黄琼脂培养基基础       (Egg Yolk Agar Base)

用    途：

用于厌氧梭状芽孢杆菌的分离培养和卵磷脂酶试验(GB/T 8538-2008，GB/T4789.28-2003中4.68，GB/T4789.12-2003，GB/T4789.13-2003)。

原    理：

蛋白胨和牛肉膏粉提供碳氮源、维生素和生长因子；葡萄糖提供能源；氯化钠维持均衡的渗透压；琼脂是培养基的凝固剂；产气荚膜梭菌具有卵磷脂酶分解卵磷脂生成不溶性甘油酯形成乳白色的混浊带。

配方（每升）：

牛肉膏粉   5g

蛋白胨 15g

氯化钠 5g

葡萄糖 10g

琼脂   15g

最终pH7.5±0.2

使用方法：

1. 称取本品50g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121℃灭菌15min，冷至50℃左右，每100mL培养基加入50%的无菌卵黄盐水悬液10—15mL，摇匀立即倾注平皿，凝固后备用。卵黄乳液：用硬刷刷洗鲜蛋，沥干，放70%乙醇中浸泡1h。以无菌操作取出蛋黄，加等体积无菌0.85%氯化钠溶液，混合置4℃贮存。

2. 取待检菌的新鲜培养物划线接种或点种于卵黄琼脂平板上，于36±1℃厌氧培养24h。

3. 观察接种点的变化。产气荚膜梭菌产生卵磷脂酶，分解卵黄中的卵磷脂，接种点的底部及周围形成乳白色的混浊带。

质量控制：

质控菌株接种至卵黄琼脂平板上于36±1℃培养24h结果如下：

菌    名   菌    号   生长状况   培养特征

产气荚膜梭菌 HK9051 良好 菌落周围及底部形成乳白色的混浊带

贮    存：贮存于避光、阴凉干燥处，用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。

规    格：250g

参考文献:

1. GB/T 4789.12-2003 中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物检验 肉毒梭菌及肉毒毒素检验

2. GB/T 4789.28-2003 中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物检验 染色法,培养基和试剂

3. GB/T8538-2008 中华人民共和国国家标准 饮用天然矿泉水检验标准

4. GB/T 4789.13-2003 中华人民共和国国家标准 食品卫生微生物检验 产气荚膜梭菌检验